Жидкая тиогликолевая среда

Жидкая тиогликолевая среда

Жидкую тиогликолевую среду рекомендуют для проведения тестов на стерильность биологических продуктов и для выделения многих аэробных и анаэробных организмов.

Краткое описание и объяснение: Quastel и Stephenson заметили, что присутствие небольшого количества соединений, содержащих SH-группы (цистеин, тиогликолевой кислота, глутатион), обеспечивает "аэробный" рост Clostridium sporogenes в бульоне с триптического перевара. Falk, Bucca и Simmons обнаружили преимущества использования небольших количеств агара (0.06-0.25%) при выявлении загрязняющих веществ при проведении тестов на стерильность биологических препаратов. Brewer продемонстрировал значение сочетания небольшого количества агара и восстановительных веществ. Эксперименты Бревер показали, что анаэробы растут одинаково хорошо в жидкой среде, содержащей 0,05% агара, независимо от наличия или отсутствия тиогликолят натрия. Marshall, Gunnish и Luxen сообщили об удовлетворительном выращивания анаэробов на тиогликолятному среде Бревер в присутствии ртутного консерванта. Нейтрализация бактериостатического действия ртутных соединений тиогликолятом натрия была подтверждена Nungester, Hood и Warren и Portwood. Vera включил в состав казеиновый пептон. Malin и Finn сообщали, широко используемое среду, содержит тиогликолят, подавляет некоторые организмы в присутствии углеводородов. Жидкое тиогликолевой среда рекомендовано FDA в Бактериологическому аналитическом руководстве и в Официальных методах анализа АОАС для проверки продуктов питания и для определения фенольного коэффициента и спорицидного эффекта дезинфектантов. Жидкое тиогликолевой среда также используют для проверки стерильности консервированной крови. Это одно из мест, ре- ваны в USP для использования в тестах на стерильность вероятно стерильных продуктов.

Результаты:

  1. После инкубации о наличии роста свидетельствует появление мутности по сравнению с незасеянных контролем.
  2. Строгие аэробы имеют тенденцию к росту в тонком слое на поверхности бульона; облигатные анаэробы будут расти только в той части бульона, расположенной ниже верхнего окисленного слоя.

Ограничения процедуры:

  1. Анаэробы могут перекрываться более быстрыми темпами роста факультативных организмов.
  2. Если чашки со средой не демонстрируют никакого роста, изучить бульон окраской по Граму.
  3. Никогда не полагайтесь исключительно на бульонные культуры для выделения анаэробов. Некоторые анаэробы могут быть ингибированные метаболическими продуктами или кислотами, образующимися факультативными анаэробами, которые растут более быстрыми темпами.
  4. Для получения подробной информации и рекомендаций по проведению процедур звернить- ся в соответствующие текстов.

Жидкое тиогликолевой среда содержит высокопитательные гидролизат казеина, дрожжевой экстракт и Lцистин, которые поддерживают пышный рост требовательных микроорганизмов. Глюкоза является углеводом, ферментируется, и источником энергии. Тиогликолят натрия и L-цистин позволяют расти клостридии даже в аэробных условиях. Небольшое количество агара способствует росту аэробных, а также анаэробов в среде, даже если тиоглдиколят натрия удаляется из среды, а также помогает в поддержании низкого окисновидновного потенциала для стабилизации среды. Натрия тиогликолят действует в качестве восстанавливающего агента и нейтрализует токсические эффекты ртутных консервантов и пероксидов, образующихся в среде, способствуя тем самым анаэробиозу, и делает среду подходящим для испытаний материалов, содержащих тяжелые металлы. Ресазурин является индикаторной красителем; при незначительном увеличении содержания кислорода резазурин меняет цвет на красный.

Панкреатический гидролизат казеина - 15,00 г / л

Дрожжевой экстракт - 5,00 г / л

Глюкоза - 5,50 г / л

Хлорид натрия - 2,50 г / л

L-цистин - 0,50 г / л

Тиогликолят натрия - 0,50 г / л

Хлорид резазурина - 0,001 г / л 

Агар микробиологический- 0,6 г / л

  1. Размешать 29,6 г сухой среды в 1 л  дистиллированной воды.
  2. Нагреть если необходимо до полного растворения частиц.
  3. Автоклавировать в течение 15 минут при 121 °С.
  4. Остудить до 25°С и хранить в темном прохладном месте, при температуре желательно ниже 25 °С.